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Size Exclusion Chomatography - Multi-Angle Light Scattering


SEC-MALS
Size Exclusion Chomatography - Multi-Angle Light Scattering

La chromatographie d’exclusion (SEC) couplée « en ligne » avec la mesure de la diffusion de la lumière laser (LS), de l’index de réfraction (RI) et de l’absorbance UV est une méthode rapide et précise pour déterminer le poids moléculaire des protéines et des complexes en solution. Grâce à la mesure de la diffusion statique de la lumière, le rayon de giration peut être déterminé, le module de mesure de la diffusion quasi-élastique de la lumière permettant quant à lui de déterminer le rayon hydrodynamique des molécules.
Les échantillons de protéine sont séparés par chromatographie d’exclusion selon leur rayon de Stockes. La lumière diffusée par les protéines est directement proportionnelle au produit de leur masse moléculaire moyenne et de leur concentration. Cette technique permet de déterminer la stœchiométrie des interactions protéine/protéine, protéine/DNA, protéine/RNA, protéine/détergent. De plus, la diffusion statique de la lumière permet de déterminer le pourcentage de glycosylation ou de PEGylation des échantillons.
Ainsi, masse moléculaire de toute protéine ou complexe peut-être mesurée par SEC-MALS, et ceci indépendamment de leur taille ou de leur conformation. Pour les plus grandes protéines (Rh>10nm) le rayon de giration peut être déterminé grâce à la dépendance angulaire de la lumière diffusée.

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Équipement : HPLC (Shimadzu), LS detector (miniDAWN TREOS, Wyatt technology), RI detector (T-rEX, Wyatt Technology)

Contact : Christophe Velours – Tel : 01 69 82 34 73


Modalité d’accès :
Une fois formé par nos ingénieurs plateforme, certains de nos équipements sont accessibles en "libre service". Vous pouvez alors accéder à notre site de réservation en ligne GIPSI.

Nos tarifs :
Nos tarifs sont consultables sur le site des plateformes GIPSI.



par Marion Blin - publié le , mis à jour le